तरल क्रोमैटोग्राफ की पाँच प्रमुख प्रणालियाँ इस प्रकार हैं:
1. इंजेक्शन प्रणाली
आम तौर पर, इंजेक्शन ऑपरेशन को पूरा करने के लिए एक डायाफ्राम इंजेक्शन सैंपलर या उच्च दबाव इंजेक्शन कक्ष का उपयोग किया जाता है, और इंजेक्शन की मात्रा स्थिर होती है।
यह विश्लेषणात्मक नमूनों की प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता में सुधार के लिए फायदेमंद है।
2. आसव प्रणाली
प्रणाली में तीन भाग होते हैं: एक उच्च दबाव पंप, एक मोबाइल चरण जलाशय, और एक ग्रेडिएंटर। उच्च दबाव वाले पंप का सामान्य दबाव 1.47~4.4X107Pa है, और प्रवाह दर समायोज्य और स्थिर है। जब उच्च दबाव वाला मोबाइल चरण क्रोमैटोग्राफी कॉलम से गुजरता है, तो यह कॉलम में नमूने के प्रसार प्रभाव को कम कर सकता है और कॉलम में इसकी गति को तेज कर सकता है। यह रिज़ॉल्यूशन में सुधार करने, नमूना पुनर्प्राप्त करने और नमूने की जैविक गतिविधि को बनाए रखने के लिए फायदेमंद है। मोबाइल चरण भंडारण त्रुटियां और ग्रेडिएंटर्स स्थिर चरण और नमूने के गुणों के अनुसार मोबाइल चरण को बदल सकते हैं, जिसमें एलुएंट की ध्रुवीयता, आयन शक्ति, पीएच मान को बदलना या अन्य तरीकों पर स्विच करना शामिल है।
3. पृथक्करण प्रणाली
सिस्टम में क्रोमैटोग्राफी कॉलम, कनेक्टिंग ट्यूब और थर्मोस्टैट शामिल हैं।
एक क्रोमैटोग्राफ़िक कॉलम की लंबाई आम तौर पर 10-50 सेमी होती है (यदि संयोजन में दो की आवश्यकता होती है, तो दोनों के बीच एक कनेक्टिंग ट्यूब जोड़ा जा सकता है), जिसका आंतरिक व्यास {{1%) मिमी होता है। यह उच्च गुणवत्ता वाले स्टेनलेस स्टील, मोटी दीवार वाली ग्लास ट्यूब, टाइटेनियम मिश्र धातु और अन्य सामग्रियों से बना है। स्तंभ 5-10 μ के व्यास से सुसज्जित है, एम के कण आकार के साथ एक निश्चित चरण (मैट्रिक्स और निश्चित तरल से बना है), जिसमें मैट्रिक्स उच्च यांत्रिक शक्ति राल या सिलिका जेल से बना है, दोनों इसमें जड़ता (जैसे कि सिलिका जेल की सतह पर सिलिकेट जीन को मूल रूप से हटाना), सरंध्रता और बड़े विशिष्ट सतह क्षेत्र की विशेषताएं हैं, इसके अलावा, इसकी सतह यांत्रिक रूप से लेपित है (गैस क्रोमैटोग्राफी में स्थिर चरणों की तैयारी के समान) या रासायनिक रूप से विभिन्न जीनों (जैसे फॉस्फेट, क्वाटरनरी एमाइन, हाइड्रॉक्सीमेथाइल, फिनाइल, अमीनो या विभिन्न लंबाई की कार्बन श्रृंखलाओं के एल्काइल समूह) या लिगैंड के साथ युग्मित होता है।
इसलिए, विभिन्न निश्चित सापेक्ष संरचनाओं वाले इस प्रकार के पदार्थों में अच्छी चयनात्मकता होती है। उदाहरण के लिए, छिद्रपूर्ण सिलिका जेल की सतह पर मटर लेक्टिन (पीएसए) को जोड़कर, एक ग्लाइकोप्रोटीन को फ़ाइब्रोब्लास्ट से अलग किया जा सकता है। इसके अलावा, स्थिर चरण प्लास्मिड छोटा है, और स्तंभ बिस्तर एक समान और घने राज्य को प्राप्त करना आसान है, जो एड़ी वर्तमान प्रसार प्रभाव को काफी कम कर सकता है। मैट्रिक्स में छोटे कण आकार और उथले माइक्रोपोर होते हैं, और नमूने में माइक्रोपोरस क्षेत्र में कम द्रव्यमान स्थानांतरण होता है। ये बैंडविड्थ को कम करने और रिज़ॉल्यूशन में सुधार के लिए फायदेमंद हैं। स्तंभ दक्षता सिद्धांत विश्लेषण के अनुसार, मैट्रिक्स कण का आकार जितना छोटा होगा, ट्रे की सैद्धांतिक संख्या N उतनी ही बड़ी होगी।
4. जांच प्रणाली
तरल क्रोमैटोग्राफी के लिए आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले तीन डिटेक्टर हैं: यूवी डिटेक्टर, अंतर अपवर्तक सूचकांक डिटेक्टर, और प्रतिदीप्ति डिटेक्टर
यूवी डिटेक्टर
यह डिटेक्टर पराबैंगनी (या दृश्य प्रकाश) प्रकाश के अवशोषण प्रदर्शन वाले नमूनों का पता लगाने के लिए उपयुक्त है।
इसकी विशेषताएं: अनुप्रयोगों की विस्तृत श्रृंखला (जैसे प्रोटीन, न्यूक्लिक एसिड, अमीनो एसिड, न्यूक्लियोटाइड, पेप्टाइड, हार्मोन, आदि का उपयोग किया जा सकता है); उच्च संवेदनशीलता (पता लगाने की सीमा 10-10g/mL); विस्तृत रैखिक सीमा; तापमान और प्रवाह दर में परिवर्तन के प्रति संवेदनशील नहीं; ग्रेडिएंट सॉल्यूशन द्वारा उत्सर्जित नमूनों का पता लगा सकता है।
5. डाटा प्रोसेसिंग सिस्टम
यह प्रणाली परीक्षण डेटा एकत्र, संग्रहीत, प्रदर्शित, प्रिंट और संसाधित कर सकती है, जिससे नमूनों को उचित पृथक्करण, तैयारी या पहचान में सक्षम बनाया जा सकता है।
संक्षेप में, तरल क्रोमैटोग्राफ में एक नमूना प्रणाली, एक जलसेक प्रणाली, एक पृथक्करण प्रणाली, एक पहचान प्रणाली और एक डेटा प्रोसेसिंग प्रणाली शामिल होती है। इन प्रणालियों का संयोजन प्रयोग को अधिक विश्वसनीय और स्थिर बनाता है।
